- 全部删除
- 您的购物车当前为空
规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
---|---|---|---|
40 T | ¥ 1,995 | 现货 |
产品编号 | 产品名称 | 产品包装 |
---|---|---|
C0118B | HA Tag Immunomagnetic Beads | 1 mL |
C0124 | Immunomagnetic Beads Cell Lysis Buffer | 20 mL |
C0125 | Immunomagnetic Beads Washing Buffer (10×) | 20 mL |
C0126 | Immunomagnetic Beads Elution Buffer | 4 mL |
C0127 | Immunomagnetic Beads Neutralization Buffer | 2 mL |
HA Tag免疫沉淀磁珠 | 特性 |
---|---|
基质 | 硅基磁珠 |
粒径 | 200 nm |
磁珠浓度 | 10 mg/mL |
结合能力 | ≥ 0.4 mg HA 标签蛋白/mL 磁珠 |
配体 | 鼠源抗HA单克隆抗体 |
应用推荐 | IP, Co-IP |
1. 细胞裂解液制备
使用Cell Lysis Buffer处理细胞样品,按照标准步骤制备细胞裂解液,置于冰上备用,或于-20℃长期保存。
2. 磁珠预处理
1)将免疫沉淀磁珠用漩涡振荡器振荡1 min,使磁珠重新悬浮,取25 µL磁珠悬液放入1.5 mL EP管中。
2)用蒸馏水将Washing Buffer (10×)稀释为1×,使用Washing Buffer (1×)进行后续实验。向EP中加入500 μL Washing Buffer进行洗涤,温和翻转EP管数次,使磁珠重新悬浮。将EP管放入磁性分离器,静置1 min,进行磁性分离,吸去上清液,取下EP管。重复上述洗涤步骤2次。
3. 免疫沉淀步骤
1)向EP管中加入500 μL制备好的细胞裂解液,将EP管放在旋转混合仪上,在37℃下旋转混合30 min。如结合力较弱,可在室温下孵育1 h,或在4℃下孵育过夜。
2)孵育结束后,进行磁性分离,弃去或保存上清以供后续分析。
3)向EP管中加入500 μL Washing Buffer进行洗涤。进行磁性分离,吸去上清液,取下EP管,重复洗涤磁珠3次。
4. 抗原洗脱
提供以下几种抗原洗脱方案,用户可根据后续检测的需要选择不同的洗脱方法。
1)变性洗脱法:此方法洗脱的样品适用于SDS-PAGE检测。向EP管中加入100 μL SDS-PAGE Loading Buffer(自备),混合均匀,95℃加热5 min。然后进行磁性分离或者离心(室温,13000 g, 10 min),收集上清液,进行SDS-PAGE检测。
2)中性洗脱法:向EP管中加入50 μL HA Peptide Elution Buffer(PBS,1 mg/mL HA peptide (TP1276),pH 7.4),置于旋转混合仪上在37℃孵育5-10 min(低于 37℃ 时需适当延长孵育时间)。然后进行磁性分离或者离心,收集上清液。为提高抗原回收率,可重复以上步骤。
3)酸性洗脱法:向EP管中加入100 μL Acidity Elution Buffer,置于旋转混合仪上在37℃孵育5-10 min。然后进行磁性分离或者离心,收集上清液。如需中和酸性洗脱液,可向100 μL洗脱液中加入50 μL Neutralization Buffer,调整pH至中性。
版权所有©2015-2024 TargetMol Chemicals Inc.保留所有权利.