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细胞凋亡是程序性细胞死亡的严格调控形式,可触发细胞自我毁灭而不受任何外部影响。细胞凋亡是生命的重要组成部分,特别是对于必须控制细胞的生长、发育和更新以维持体内平衡的多细胞生物而言。检测细胞凋亡的方法有很多,根据凋亡细胞形态特征,利用光学显微镜、激光扫描共聚焦显微镜和透射电子显微镜等来观察细胞;也可以根据细胞凋亡过程中的时相变化检测是否发生凋亡,常见的有Caspase活性检测、Annexin V检测、线粒体膜电位检测、TUNEL检测等。
TargetMol能够为广大科研工作者提供细胞凋亡检测服务。我们提供的细胞凋亡检测以Annexin V-FITC/PI双染法为主。在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合,因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V进行荧光素(EGFP、FITC)标记,以标记了的Annexin V作为荧光探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。碘化丙啶(Propidium Iodide,PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但凋亡中晚期的细胞和死细胞由于细胞膜通透性的增加,PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。所以,通过Annexin V和PI双染的方法,就可以把早期凋亡的细胞与晚期凋亡加坏死的细胞区分开来。
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