6-TAMRA (6-Carboxytetramethylrhodamine) serves as a popular fluorophore for the creation of bioconjugates, particularly in the synthesis of fluorescent antibodies and avidin derivatives employed in immunochemistry.

6-TAMRA 标记核苷酸实验
操作步骤
1.样品处理：在 NHOH/甲胺（1:1）溶液中，65°C 孵育 10 分钟，从 CPG 中分离出寡核苷酸。
2.取上清液，用1 mL EtOH/MeCN/H2O（3:1:1）洗涤 CPG 。
3.将上清混合并干燥。
4.用新鲜无水三乙基氟化三氢铵/ n-甲基吡啶酮（250 μL， n-甲基吡啶酮 1.5 mL，三乙胺750 μL，茶- 3hf 1.0 mL）在 65℃ 下处理 1.5 h，从 RNA 残留物中去除t-丁基-二甲基硅基保护基团，加入 25 μL 3 M NaOAc 和 1 mL n-BuOH沉淀寡核苷酸。
5.样品在 -70℃ 下冷却 1 h，然后在 10000 g 下离心 30 min。倒清上清，用水溶液 EtOH （70% v/v）洗涤，然后干燥。
6.将 6-TAMRA（0.1 mL，10 mg/mL 二甲亚砜溶液）加入到悬浮在 1.0 mL 碳酸氢钠缓冲液（pH 8.5）中的 3'-氨基修饰寡核苷酸中，37℃ 下孵育 12 h。
7.标记的寡核苷酸在水中重悬，通过 G25 Nap-10 一次性脱盐柱去除游离染料。
8.在 0.1 M 三乙基乙酸铵（TEAA）缓冲液中，pH 为 7.2 ，用乙腈线性梯度高效液相色谱纯化寡核苷酸。
9.将整个样品装在 Hamilton PRP-1 色谱柱，用乙腈线性梯度洗脱 40 分钟。在 260 和 297 nm 处监测样品，收集双标记寡核苷酸种类对应的峰。