• 造模机制：

  N-Nitrosodiethylamine(DEN) 作为经典的 N - 亚硝基类肝致癌物，进入大鼠体内后经肝脏细胞色素 P450 酶代谢活化，产生具有烷化活性的中间体；该中间体可与肝细胞 DNA 结合形成加合物，导致碱基损伤、基因突变，同时引发氧化应激（活性氧 ROS 蓄积），启动核因子 -κB（NF-κB）信号通路，促进促炎因子（TNF-α、IL-6）释放，诱导肝细胞炎症、坏死、异常增殖，逐步进展为肝纤维化、肝细胞腺瘤，最终形成肝细胞癌（HCC），模拟人类化学性肝肿瘤的完整病理进程。

• 相关产品：

  N-Nitrosodiethylamine (T35455)

• 造模方法：

  实验对象：

  大鼠, 雄性, 体重 200-250g, 年龄 3-4 个月

  给药剂量和方式：

  ① 核心造模：N-Nitrosodiethylamine, 200 mg/kg, 无菌生理盐水溶解, 腹腔注射；
  ② 促进剂联合（可选）：造模后可联合苯巴比妥（50 mg/kg/ 天，混入饲料），加速肝肿瘤进展；
  ③ 对照处理：对照组给予 10% 吐温 80 溶液（口服）或等体积生理盐水（腹腔注射），其余饲养及处理条件一致；
  ④ 干预验证组（可选）：造模同时给予肝保护剂（如 5 - 亚苄基 - 2 - 硫代乙内酰脲）, 50 mg/kg, 口服, 持续 3-6 周

  给药频率和周期：

  单剂量

• 模型验证：

  1. 生化指标： - 肝功能：造模 3-6 周后，血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）显著升高（p<0.05），提示肝细胞损伤； - 炎症因子：血清 TNF-α、IL-6 水平显著上调（p<0.05），反映肝脏炎症启动； 2. 病理指标： - 肝损伤 / 癌前病变（3-6 周）：HE 染色显示肝小叶结构破坏、窦状隙扩张、门静脉周围纤维化、炎症细胞浸润；6 周可见肝细胞腺瘤、肝紫癜（peliosis hepatis）； - 肝肿瘤（6-12 个月）：形成典型肝细胞癌病理特征，肿瘤组织呈巢状或条索状排列，细胞异形性明显； 3. 免疫组化指标： - 增殖标志物：Ki-67（细胞增殖标志物）在肝细胞 nucleus 中强阳性表达（深色棕染）； - 肝细胞特异性标志物：HSA（肝细胞特异性抗原）在细胞质中强阳性表达（金黄色颗粒），提示肝细胞异常增殖。

*注意事项：在保持生命 14 天后，即第 15 天，小鼠被献祭以按照标准方法测量血清生化（肝脏和肾脏）参数

*参考文献：Akree LS,et,al. In silico and in vivo hepatoprotective activity of the synthesized 5-benzylidene-2-thiohydantoin against diethylnitrosamine-induced liver injury in a rat model. Sci Rep. 2023 Mar 22;13(1):4681.