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Cell Counting Kit-8 (CCK-8)
产品编号 C0005
Cell Counting Kit-8 (CCK-8)试剂盒通过采用水溶性四唑盐 WST-8 (化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)实现快速检测，其原理是 WST-8在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的脱氢酶还原生成橙黄色的甲臜染料（formazan）。通过比色，可以动态地量化活细胞的数量，从而对细胞增殖或药物毒性进行检测。CCK-8溶液可直接加入到细胞中，不需要与其它组分预混，操作方便，检测准确。
| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 1 mL (100 T) | ¥ 168 | 现货 | |
| 5 mL (500 T) | ¥ 419 | 现货 | |
| 10 mL (1000 T) | ¥ 689 | 现货 | |
| 30 mL (3000 T) | ¥ 1,596 | 现货 | |
| 100 mL (10000 T) | ¥ 4,760 | 现货 |
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检测原理
Cell Counting Kit-8 (CCK-8)是一种氧化还原反应的指示剂，在电子载体1-Methoxy PMS存在的条件下，利用活细胞中的脱氢酶催化四唑盐WST-8生成甲臜染料，而且甲臜染料的生成量与活细胞的数量成线性关系。
| 检测方法 | MTT法 | XTT法 | WST-1法 | CCK8法 |
|---|---|---|---|---|
| 甲臜产物的水溶性 | 差 | 好 | 好 | 好 |
| 产品性状 | 粉末 | 2瓶溶液 | 溶液 | 1瓶溶液 |
| 使用方法 | 配成溶液后使用 | 现配现用 | 即开即用 | 即开即用 |
| 检测灵敏度 | + | ++ | ++ | +++ |
| 检测时间 | 较长 | 较短 | 较短 | 最短 |
| 检测波长 | 560~600nM | 420~480nM | 420~480nM | 430~490nM |
| 细胞毒性 | 高，细胞形态完全消失 | 很低，细胞形态不变 | 很低，细胞形态不变 | 很低，细胞形态不变 |
| 试剂稳定性 | 一般 | 较差 | 一般 | 很好 |
| 批量样品检测 | 可以 | 非常适合 | 非常适合 | 非常适合 |
| 便捷程度 | 一般 | 便捷 | 便捷 | 非常便捷 |
产品优势
- CCK-8的检测灵敏度高于其他方法，如MTT，XTT或WST-1；
- 操作更简单，无需有机溶剂；
- 对细胞无毒性；
- 稳定的试剂，即开即用。
应用领域
- 细胞增殖测定
- 细胞活力检测
- 细胞因子实验
- 细胞毒性实验
操作说明
1. 接种细胞悬液100μL 于96孔板，在细胞培养箱中（37°C, 5% CO2）孵育。
2. 取出需要检测的细胞，于细胞培养液中直接加入1/10体积的Cell Counting Kit-8 (CCK-8)，充分混合，保证孔中颜色均一性，但不可有气泡产生。对96孔板，每 100µl培养液加入10µl检测试剂。
3. 继续于细胞培养箱中培养1-4小时。
4. 酶标仪读数之前，置于孔板于摇床振荡上约1min，确保孔板颜色均匀。
5. 用酶标仪读取450nm光吸收值，计算细胞活性。
细胞存活率=[(实验组-空白组) / (对照组-空白组)] × 100%
细胞抑制率=[(对照组-实验组) / (对照组-空白组)] × 100%
实验组：含细胞、培养基、CCK-8和药物；
对照组：含细胞、培养基、CCK-8，不含药物；
空白组：含培养基、CCK-8，不含细胞、药物。
6. 可选步骤：在100μl细胞中加入10 μl 3 % SDS 以终止反应，可在3天内读取数据。
储存条件
4℃避光可保存一年，-20℃避光可保存两年。
注意事项
- 使用前请充分混匀，避免反复冻融
- 96孔板注意边缘效应，建议弃用周围一圈板孔，改加相同量的PBS。
- 本产品只能用于研究，严禁用于人体。
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