⾼通量药物筛选指南（二）

基于表型的药物筛选⽅案

若未明确药物靶点，可以选择从表型⼊⼿筛选有效化合物。基于表型的药物筛选是以拟设计药物作⽤的靶细胞作为研究对象，这是更接近⽣理条件的药物筛选模型。应⽤细胞培养技术获取所需细胞，将这些细胞与候选化合物相互作⽤，通过显微镜或酶标仪收集产⽣的信号评估化合物的作⽤效果，从⽽对化合物进⾏筛选。

TargetMol提供100+肿瘤细胞，助⼒科研⼈员在药物研发的各个阶段进⾏⾼通量筛选、活性化合物发现、结构优化及⽣物活性研究。

>表型筛选参考案例

Fangchinoline suppresses conjunctival melanoma by directly binding FUBP2 and inhibiting the homologous recombination pathway IF=8.46

结膜⿊⾊素瘤（CM）是⼀种罕⻅和致命的眼部肿瘤，约占所有眼部恶性肿瘤的2%，和所有⾮⽪肤⿊⾊素瘤的1.6%。迄今为⽌，丝裂原活化蛋⽩激酶（MEK）抑制剂MEK162是唯⼀⼀种FDA批准的靶向药物，⽤于治疗NRAS突变的晚期⽪肤⿊⾊素瘤。尽管⼀些特定的抑制剂在临床试验中显⽰出积极的效果，但在CM患者中还没有BRAF或NRAS突变靶向药物被批准。

研究⽬的：⽼药新⽤⸺针对1347种抗CM药物进⾏表型筛选获得潜在候选药物，筛选对象为⼀名具有典型NRAS突变的汉族患者的CM-as16细胞。

①细胞活⼒（CCK8）⽅法筛选1347种药物；

②通过转录组分析和qRT-PCR检测Fangchinoline对CM-AS16细胞HR通路的影响；

③靶标验证（ABPP），Fangchinoline在CM-AS16细胞中靶向FUBP2；

④Fangchinoline抑制HR通路，增加DNA损伤诱导药物的敏感性；

⑤基因沉默验证Fangchinoline对HR通路的作⽤解析作⽤机制。

>基于表型筛选案例

Blockade of NMT1 enzymatic activity inhibits N-myristoylation of VILIP3 protein and suppresses liver cancer progression IF=39.3

01研究⽬的

肝细胞癌（HCC）是最常⻅的肝癌类型，预后较差，是全球癌症相关死亡的第四⼤原因

研究⽬的：寻找具有抗肿瘤疗效和低毒性的潜在HCC治疗药物药物再利⽤；

02 ⾼通量筛选

⾼通量筛选：FDA上市药物库Cell viability assay CCK8

抗过敏药物地氯雷他定可以抑制HCC细胞系、细胞源异种移植（CDX）、患者源类器官（PDO）、患者源异种移植（PDX）模型

03靶点鉴定

靶标鉴定：DARTS＋SPR

确定N-⾁⾖油酰基转移酶1(NMT1)为地氯雷他定的靶蛋⽩

04调节机制

NMT1表达上调可增强肿瘤的体外和体内⽣⻓，⽽NMT1敲低可抑制肿瘤的⽣⻓

05结合位点确认

结合位点确认：分⼦对接+SPR

地氯雷他定与NMT1中的Asn-246结合并抑制其酶活性，破坏NMT1介导的VILIP3蛋⽩⾁⾖醇化和随后的NFκB/Bcl-2信号传导

06研究结论

本研究表明地氯雷他定可能是⼀种新的抗癌药物，NMT1介导的⾁⾖⾁酰化有助于HCC的进展，是HCC的潜在⽣物标志物和治疗靶点。

【CCK-8实验】

【DARTS实验】

【SPR实验】

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