Hoechst 33342 (bisBenzimide H 33342), is a Benzimidazole fluorescent dye and a Cell permeable fluorescent DNA stain; binds minor groove of AT-rich regions. HOE 33342 trihydrochlorde is used to quantify DNA in viable cells.

一、Hoechst 33342工作液的配制
1. 储备液的配制
请使用 DMSO 将Hoechst 33342配制 1 mg/mL 的储备液。
注：Hoechst 33342 储备液建议分装后于 -4℃ 或 -20℃ 避光保存，请您避免反复冻融。
2. 工作液的配制
用纯的DMEM或 PBS 稀释储备液，稀释成终浓度为 10 μg/mL 的Hoechst 33342 工作液。
注：请根据实际情况调整 Hoechst 33342 工作液的浓度，建议您现配现用。

二、细胞染色
1. 悬浮细胞
1）离心收集细胞后加入 PBS 洗涤细胞两次，动作轻柔，每次洗涤 5 min。建议细胞密度在 1×106/mL
2）加入 1 mL Hoechst 33342 工作液，室温下孵育 3-10 min。
3）请您使用离心机， 400 g，离心 3-4 min，弃去上清。
4）加入 PBS 洗涤细胞两次，动作轻柔，每次洗涤 5 min。
5）用 1 mL 纯的DMEM或 PBS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。

2. 贴壁细胞
1）将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
2）从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基，动作轻柔。
3）加入 100 μL 的Hoechst 33342工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，室温下孵育 3-10 min。
4）吸去Hoechst 33342工作液，用纯的DMEM洗 2-3 次，每次洗涤 5 min，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。

注意事项：
1. 您可以根据您的实验目的自行调整 Hoechst 33342 的工作液浓度。
2. 本产品仅限于科研，禁止用作其他。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。