BIX02188 is a selective and potent MEK5 inhibitor that inhibits MEK5-induced apoptosis in cells expressing the oncogenic mutant FLT3-ITD.

LCK:390 nM, CSF1R (FMS):280 nM, c-Kit:550 nM, MAPK14 (p38 alpha):3.9 μM, JAK3:7.8 μM, RPS6KA3/RSK2:4.1 μM, SRC:8.9 μM, RPS6KA6/RSK4:3.2 μM, ERK5:810 nM, TGFβRI:1.8 μM, Abl-1:2.1 μM, MEK5:4.3 nM

BIX02188是纯化、活性的MEK5酶的有效催化功能抑制剂。在激活的HeLa细胞中，BIX02188阻断了ERK5的磷酸化，但不影响ERK1/2、JNK和p38 MAP激酶的磷酸化。为了表征BIX02188在培养内皮细胞(EC)中的效应，使用H2O2来激活BMK1。牛肺微血管内皮细胞(BLMECs)经过0.1-10 μM BIX02188预处理30分钟，然后刺激300 μM H2O2。H2O2引起BMK1的显著激活，在20分钟时达到峰值。磷酸化的BMK1受到BIX02188剂量依赖的抑制，IC50为0.8±1.0 μM，在浓度大于3 μM时达到最大抑制效果。为了检验BIX02188的特异性，测量了0.1-10 μM BIX02188对ERK1/2和JNK活性的影响。在这些浓度下，ERK1/2和JNK的活性没有显著抑制。这些观察结果确认了BIX02188对MEK5诱导的BMK1磷酸化的选择性[3]。BIX02188抑制了MEK5和ERK5的活性，IC50分别为4.3 nM和810 nM。BIX02188不抑制密切相关的激酶MEK1、MEK2、ERK2和JNK2。BIX02188以剂量依赖的方式抑制ERK5的磷酸化[2]。为了评估podocytes对TGFβ1促纤维化刺激的增殖反应，将podocytes在存在和不存在BIX02188(10 μM)的情况下预孵育60分钟，然后与TGFβ1(2.5 ng/mL)共同处理48小时，以提供足够的增殖时间。采用比色细胞增殖分析，其中代谢活性与细胞数成正比。BIX02188孵育抑制Erk5的激活降低了podocyte细胞数。TGFβ1刺激增加了podocyte细胞数，但在BIX02188共同处理后得到了阻止[1]。