AChE/BChE-IN-23 (Compound 6e) is a dual inhibitor of acetylcholinesterase and butyrylcholinesterase, exhibiting IC50 values of 0.91 μM for AChE, 1.19 μM for eqBChE, and 1.01 μM for hBChE. This compound also demonstrates antioxidant properties and inhibits the aggregation of Aβ1-42 and Tau proteins. Moreover, AChE/BChE-IN-23 prevents the activation of microglial cells by inhibiting the release of reactive oxygen species and mitochondrial damage. Additionally, it reduces the levels of the NLRP3 inflammasome in human microglial cells and reverses memory impairment in mice induced by scopolamine.

AChE (human):0.91μM(IC50), eqBCHE:1.19μM(IC50), NLRP3:1.02μM(IC50)

AChE/BChE-IN-23 引起碘化丙啶 (5 μM，2.06%；10 μM，11.78%；20 μM，14.47%；50 μM，27.53%) 对 AChE 酶的移位。此化合物在20 μM浓度下显示出显著的抗氧化活性，DPPH清除率达47.30%，IC 50 为15.17 μM。此外，AChE/BChE-IN-23 在3.125 μM浓度和72小时内显著抑制了Aβ 1-42 (12.5 μM) 的聚集，同样条件下，1.125 μM浓度有效抑制Tau (5 μM) 的聚集。该化合物在1-20 μM浓度和24小时处理后对PC-12细胞无毒性。在12.5 μM浓度和24小时处理下，AChE/BChE-IN-23降低ROS释放并修复线粒体膜电位，从而抑制小胶质细胞激活，同时通过抑制小胶质细胞中炎性小体和NF-κB的激活表现出抗炎作用。

AChE/BChE-IN-23（10 mg/kg，腹腔注射，连续14天）有效逆转了东莨菪碱引发的阿尔茨海默病模型AD小鼠的空间和认知记忆损伤。同时，AChE/BChE-IN-23（2000 mg/kg，灌胃，14天）对Swiss albino小鼠展示出良好的安全性，未观察到急性毒性症状，如体重异常增加、行为改变、抽搐、震颤或腹泻。