MitoTracker Orange CMTMRos is a live cell fluorescent dye that labels mitochondria in living cells by mitochondrial membrane potential accumulation and is suitable for live cell imaging and apoptosis studies.

溶液配置：
1.用DMSO配置一定浓度的母液（10mM），工作液配置成10-1000nM。
注意：母液请分装放于-20℃或者-80℃，避免反复冻融，工作液请您现配现用。
实验操作步骤：
本实验分为活细胞和固定细胞的标记，对于活细胞，请您按照步骤1-7，对于固定细胞，请您按照步骤 8-13 。
细胞标记：
1. 在所需的细胞培养基中制备 25-500 nM 的工作液，并将其加热至细胞培养温度。
2. 从盖玻片上生长的细胞中吸出培养基。
3. 将细胞浸入标记培养基中 15-45 分钟，温度为 37°C。
4. 吸出标记培养基，并用培养基冲洗细胞三次。
5. 装上细胞。
6. 使用荧光显微镜检查细胞。如果荧光染色太低，请尝试以下选项之一：
1) 在正常培养基中再孵育 30 分钟，使硫醇结合继续进行;
2) 尝试使用更高的标记溶液初始浓度。
7. 当荧光足够时，对细胞进行成像。
8. 执行步骤 1-4，但使用工作浓度在 100 到 1000 nM 之间的标记溶液。
9. 用 PBS冲洗细胞三次。
10. 将细胞在 PBS 中的 3.7% 甲醛（pH 7.4）中固定 10 分钟。
11. 抽吸并在 PBS 中冲洗细胞三次，每次 5 分钟。
12. 安装盖玻片。
13. 对细胞进行成像。