HDACs/EZH2-IN-1 (Compound 22a) is a dual inhibitor of HDACs and EZH2, exhibiting potent inhibitory activity, with EZH2 Y641N being suppressed by 98% at 50 nM. It selectively targets HDAC1 and HDAC6, with IC50 values of 0.23 μM and 0.07 μM, respectively. HDACs/EZH2-IN-1 effectively inhibits the proliferation of diffuse large B-cell lymphoma cells harboring EZH2 mutations and various acute myeloid leukemia cells. Additionally, this compound has the capability to induce cellular differentiation and apoptosis (Apoptosis).

HDAC1:0.23μM(IC50), EZH2 (WT):0.84nM(IC50), EZH2 (Y641N):1.36nM(IC50), HDAC11:>10μM(IC50), HDAC4:>10μM(IC50), HDAC6:0.07μM(IC50)

HDACs/EZH2-IN-1 在特定浓度和处理时间下对多种细胞类型展示显著生物活性。在5 μM浓度、处理时间为48至120小时的条件下，该化合物对携带EZH2 Y641N突变的DLBCL细胞株SU-DHL-6显示出显著的抗增殖效果，IC50分别为1.04 μM（48小时）和0.17 μM（120小时）。此外，HDACs/EZH2-IN-1在0.1至100 μM范围内、处理时间为48小时时能有效抑制AML细胞生长，具体表现在MV4-11细胞的IC50为1.39 μM，U937为2.45 μM，OCI-AML3为1.32 μM。同样条件下，该化合物还能增加HDAC1/2/3的底物乙酰组蛋白H3（AC-HH3）和HDAC6的底物乙酰-α-微管蛋白（AC-α-tubulin）的细胞内水平。在2 μM浓度、48小时处理后，HDACs/EZH2-IN-1可诱导MOLM13细胞分化，并提高髓系成熟标志物CD11b和CD14的表达；在2至4 μM范围内则呈剂量依赖性地诱导MOLM13细胞凋亡。该化合物在1至2 μM浓度下，可与其他抗AML药物（阿糖胞苷、柔红霉素、吉瑞替尼）协同作用，共同发挥对MOLM13细胞的抗癌效果。在体内代谢稳定性方面，HDACs/EZH2-IN-1在人体和大鼠血浆中表现良好，其半衰期分别超过180分钟和138分钟。