Tolinapant (ASTX660) is an orally bioavailable cIAP1/2 and XIAP antagonist that induces expression of immunogenic cell death (ICD) markers in sensitive HNSCC cell lines in vitro.

方法：用 IFN-γ（阳性对照，10 ng/mL）、TNFα （20 ng/mL）、Tolinapant (ASTX660)（500 nM，1 μM）和 ASTX660（250 nM、500 nM、1 μM）+ TNFα 处理 4 种人 HNSCC 细胞系 （3 HPV-、1 HPV+） 48 小时，然后通过流式细胞术分析细胞内 APM 成分。
结果：在所有 4 个细胞系中，HLA-A、B、C 表达在 ASTX660 + TNFα 处理下持续增加 ASTX660 + TNFα 可能增强肿瘤细胞杀伤。[1]
方法：ASTX660 （0.04,0.2,1μM，24小时）处理DLD1、HCT116和SW48。洗涤和细胞裂解后，使用对指定蛋白质具有特异性的抗体进行蛋白质印迹分析。
结果：ASTX660 浓度低至 40 nm 就足以快速降低 cIAP2（但不能降低 cIAP1）水平。[2]

方法：Tolinapant (ASTX660) (16 mg/kg，口服），XRT （单剂量 8 Gy）或两者的组合治疗使用 MEER 同基因的肿瘤异种移植小鼠模型。收获肿瘤、脾脏和 DLN，并通过流式细胞术分析 CD8 淋巴细胞。消化肿瘤亚群并磁选 T 细胞，并与呈递 p15E 肽的灭活树突状细胞共培养。随后的 IFN-γ 的产生使用 ELISpot 测定进行定量。
结果：在单独接受 ASTX660 治疗的动物和接受放射± ASTX660治疗的动物亚群中，脾脏中的 CD8 + T 细胞数量显着增加 （图 3（b)).在单独接受 XRT 治疗的动物的引流淋巴结中，CD8 T 淋巴细胞的数量显著增加，在接受联合治疗的动物中，CD8 T 淋巴细胞的数量几乎显著增加。[1]