3CAI is a potent and specific AKT1 and AKT2 inhibitor which showed significant inhibition of AKT in an in vitro kinase assay and suppressed expression of AKT direct downstream targets such as mTOR and GSK3β as well as induced growth inhibition and apoptosis in colon cancer cells.

3CAI是一种潜在的AKT抑制剂，且作为AKT1抑制剂的效力远高于PI3K（分别在1μM和10μM浓度下抑制率为60%）。在1% FBS/McCoy's 5A培养基中（对于HCT116细胞），使用4μM的3CAI、I3C或AKT抑制剂处理HCT116和HT29结肠癌细胞，并在6cm培养皿上培养4天。结果显示，与未处理的对照细胞相比，3CAI显著增加了HCT116和HT29结肠癌细胞中的凋亡细胞数量[1]。3CAI以时间依赖性方式明显减少了AKT介导的mTOR（Ser2448）和GSK3β（Ser9）的磷酸化位点。此外，在处理12或24小时后，3CAI还上调了促凋亡标志蛋白p53和p21。基于这些筛选数据，通过体外激酶活性测定来测试3CAI对AKT1、MEK1、JNK1、ERK1和TOPK激酶活性的影响。结果表明，1μM的3CAI仅抑制AKT1激酶活性，而对其他测试的激酶无影响。3CAI以剂量依赖的方式显著抑制AKT1和AKT2的活性，并抑制AKT的下游靶标，诱导凋亡。

HCT116癌细胞被注射入裸鼠的右侧腹部。鼠类每周5次口服给药3CAI（20或30 mg/kg）、I3C（100 mg/kg）或载体溶液，连续21天，以检测3CAI的体内抗肿瘤活性。研究发现，30 mg/kg的3CAI在肿瘤组织中显著抑制了这些AKT目标蛋白的表达[1]。以30 mg/kg 3CAI治疗的鼠类，与载体处理组相比，HCT116肿瘤生长被显著抑制了50%（p<0.05）。值得注意的是，与载体处理组相比，鼠类似乎能够耐受这些剂量的3CAI治疗，没有明显的毒性迹象或体重显著减轻。