VS-5584 (SB2343) is a pan-PI3K/mTOR kinase inhibitor.

mTOR:3.4 nM, PI3Kγ:3.0 nM, PI3Kα:2.6 nM, PI3Kβ:21 nM, PI3Kδ:2.7 nM

VS-5584是一种ATP竞争性抑制剂，以等同的低纳摩尔浓度选择性抑制PI3K/mTOR信号传导，对所有人类PI3K亚型及mTOR激酶均有效。在HMLE乳腺癌细胞中，VS-5584对癌干细胞具有约10倍的选择性，EC50为15 nM。它优先降低HMLER不朽化乳腺癌细胞系中CD44Hi/CD24Lo细胞数量。在SUM159细胞中，VS-5584有效清除癌干细胞旁系群体。一项大型人类癌细胞系板筛查（436系）显示了广泛的抗增殖敏感性，并且携带PI3KCA突变的细胞对VS-5584处理通常更为敏感。在携带FLT3-ITD的MV4-11细胞中，VS-5584分别以12和13 nM的IC50阻断pAkt (S473)和pAkt (T308)。VS-5584对pS6 (S240/244)、pAkt (S473)、及pAkt (T308)的IC50分别为20、23和15 nM。[1][2]

在携带三阴性乳腺癌肿瘤的小鼠中，VS-5584的口服给药能减少肿瘤癌干细胞并在耐紫杉醇模型中诱导肿瘤退化。[1] 在PTENnull人类前列腺PC3异种移植模型中，VS-5584治疗显著抑制肿瘤生长(TGI)，分别为79%和113%，对于11和25 mg/kg剂量。在FLT3-ITD AML异种移植模型中，VS-5584治疗导致剂量依赖性的肿瘤生长抑制(3.7 mg/kg的28%和11 mg/kg的76%)。[2]

In vitro mTOR kinase assays : The reaction mixture consisted of the following components in 10 μL assay buffer (50 mM Hepes pH 7.5, 10 mM MgCl 2, 3 mM MnCl 2, 1 mM EGTA, 2 mM DTT, 0.01%Tween-20): 0.10 μg/mL of in-house generated mTOR enzyme, 0.05 μM ULight-eIF4E-binding protein 1 (Thr37/46) peptide and 10 μM ATP. The mixture is incubated for 60 min at room temperature. 10 μL of Detection mixture consisted of 16 mM EDTA, 0.004 mM Eu-W1024-labeled Anti-Phospho-eIF4E-binding protein 1-(Thr37/46) antibody and 1X LANCE? Detection Buffer is then added and incubated for 60 min.

CellTiter-Glo assay(Only for Reference)