FRAX486 HCL is a potent p21-activated kinase (PAK) inhibitor with IC50 values of 14, 33, 39 and 575 nM for PAK1, PAK2, PAK3 and PAK4 respectively.

PAK4:575 nM, PAK1:14 nM, PAK2:33 nM, PAK3:39 nM

在WPMY-1细胞中，FRAX486以浓度依赖的方式（1-10 µM）引起肌动蛋白纤维的退化。这一过程伴随着增殖率的减缓，从1至10 µM FRAX486开始观察到此现象。FRAX486对WPMY-1细胞的细胞毒性呈时间和浓度依赖性。在WPMY-1细胞中，FRAX486对肌动蛋白组织、存活和增殖的影响在1-5 µM浓度下已经出现。在这些浓度下，可期望PAK1-3完全抑制，而PAK4可能只被部分抑制[2]。

FRAX486能穿过血脑屏障，在服用后1小时内即可在大脑中达到治疗有效浓度，并且能持续24小时，其中在目标组织中的最高浓度出现在8小时。日常剂量服用可在大脑中维持FRAX486的稳定水平。FRAX486特异性地挽救了Fmr1 KO的异常，其中顶端神经元出现了脊柱表型，而非简单地减少脊柱密度，这与基因型或表型的存在与否无关。此外，FRAX486还能降低过度活跃和刻板运动，这两种表型是脆性X综合征小鼠模型的特征。

Cells are grown in 96-well plates (20,000 cells/well) for 24 h, before FRAX486, IPA3, or DMSO are added in indicated concentrations (1, 5, 10 μM). Subsequently, cells are grown for different periods (24, 48, 72 h). Separate controls are performed for each period. At the end of this period, 10 μl of [2-(2-methoxy-4-nitrophenyl)-3-(4-nitrophenyl)-5-(2,4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium monosodium salt (WST-8) from CCK-8 is added, and absorbance in each well is measured at 450 nm after incubation for 2 h at 37°C.