DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl) is a stable nitrogen-centered radical that can be used to measure the free radical scavenging activity of antioxidants. DPPH has a single electron, so it can accept either an electron or a hydrogen ion, and has a maximum absorption at a wavelength of 517 nm.

方法: PNT2 细胞用 DPPH (156-5000 µM) 处理 24 h，通过 MTT assay 检测细胞活力。
结果: 625 µM 和较低浓度的 DPPH 对细胞没有明显的细胞毒性作用。相反，在 1250、2500 和 5000 µM 下，DPPH 以剂量依赖的方式诱导活细胞减少，分别为 56%、23% 和 15%。DPPH 的 IC50 为 1400 µM。[1]
方法: DPPH 检测化合物的抗氧化能力：
1、制备了 75 µM的 DPPH 甲醇溶液。样品在 1-10 µM 的三种不同终浓度下稀释和分析。
2、将 50 µL 体积的每种样品溶液加入 0.95 0mL DPPH溶液中，置于黑暗中。
3、30 min 后，在 λ=517nm 处测量样品的吸光度。
4、绘制 DPPH 抑制百分比与抗氧化剂浓度的关系图，计算出 IC50 值，和作为 IC50 倒数的抗自由基活性 (ARA)。[2]

方法: 为研究肝毒性作用，将 DPPH (100 mg/kg) 腹腔注射给 ICR 小鼠诱导急性肝损伤，治疗后 12、24、48 和 72 h，处死小鼠以获取血清和肝脏。
结果: DPPH 可提高转氨酶活性、MDA 和 NO 水平，同时显著降低 GSH 水平和 SOD、CAT 和 GPx 活性。DPPH 处理的小鼠肝脏显示出明显的组织病理学变化，其特征是肝细胞肿胀和空泡变性。DPPH 治疗组促炎细胞因子的 mRNA 水平升高。上述结果表明，DPPH可诱导小鼠急性肝毒性。[3]