RhoNox-1, a fluorescent probe, specifically detects divalent iron ions (Fe 2+) by generating an irreversible orange (red) fluorescent product with an excitation and emission maxima at 540 and 575 nm respectively (Ex/Em: 540/575 nm). Upon reacting with Fe 2+, RhoNox-1 efficiently permeates cells, making it ideal for monitoring Fe 2+ in living cells. The probe predominantly localizes in the Golgi apparatus [1].

RhoNox-1工作液的制备：1.1 用110μL无水DMSO配制50μg的RhoNox-1，得到1mM储备液。1.2 用预热好的无血清细胞培养基或PBS稀释储存液，配制成1-10μM的RhoNox-1工作液。注：请根据实际情况调整RhoNox-1工作液浓度，且现用现配。细胞染色（悬浮细胞）：2.1 离心收集悬浮细胞，加入PBS洗涤两次，每次5分钟，细胞密度为1×10^6/mL。2.2 加入1mL工作液，在室温孵育5-30分钟。2.3 以400g离心3-4分钟，弃去上清。2.4 用PBS洗涤细胞两次，每次5分钟。2.5 用1mL无血清培养基或PBS重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。细胞染色（贴壁细胞）：3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。3.2 从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。3.3 加入100μL染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，室温孵育5-30分钟。3.4 吸去染料工作液，用培养基洗2-3次，每次5分钟，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。