Fluo-3FF AM is a low-affinity (Kd = 42 μM), Mg 2+ insensitive, and relatively photostable fluorescent Ca 2+ sensitive indicator (Abs/Em = 462 nm/526 nm). It is essentially non-fluorescent but exhibits strong fluorescence enhancement upon entry into cells and binding to calcium. [1]

Fluo-3FF AM 工作液的配制需采用0.025% (w/v) 的 Pluronic F-127/二甲基亚砜溶液稀释 Fluo-3FF AM 制备 1 mM 的储备液，储存液建议分装后于 -20℃ 或 -80℃ 避光保存。然后用平衡缓冲溶液配制成 5 μM 的 Fluo-3 AM 工作液，根据实际情况调整 Fluo-3FF AM 工作液浓度，且现用现配。细胞染色步骤如下：将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上，从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基，加入 100 μL 染料工作液并轻轻晃动，孵育 60 分钟，再吸去染料工作液，在 4℃ 的 PSS 中清洗 60 分钟。