ER-Tracker dye, a derivative of BODIPY series dyes coupled with Glibenclamide, exhibits high selectivity for the endoplasmic reticulum and is non-toxic to cells at low concentrations. This environmentally sensitive probe retains part of its fluorescence after formaldehyde treatment and features high fluorescence life and a good extinction coefficient. Glibenclamide, an ATP-dependent K+ channel blocker (Kir6, KATP) and CFTR Cl-channel blocker, binds in the endoplasmic reticulum. However, ER-Tracker is not suitable for staining cells after fixation [1].

ER-Tracker 工作液的配制：1.制备储存液 用 172 μL 无水 DMSO 稀释 100 μg ER-Tracker，配制成 1 mM 储备液。注：建议将 ER-Tracker 储存液分装后于 -20℃ 或 -80℃ 避光保存。2.工作液的配制 用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，配制成 100 nM-1 μM 的 ER-Tracker 工作液。注：请根据实际情况调整 ER-Tracker 工作液浓度，且现用现配。细胞染色（悬浮细胞）：1.离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟，细胞密度在 1×10⁶ /mL。2.加入 1 mL ER-Tracker 工作液，室温孵育 5-30 分钟。3. 400 g 离心 3-4 分钟，弃去上清。4.加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。5.用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。细胞染色（贴壁细胞）：1.将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。2.从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。3.加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，孵育 5-30 分钟。4.吸去染料工作液，用培养基洗 2-3次，每次 5 分钟，用荧光显微镜进行观察。注：若需用流式细胞仪检测，需将细胞用胰蛋白酶消化后重悬再染色。