DiIC16(3), a long-chain carbocyanine dye, is extensively utilized for labeling cells, organelles, liposomes, viruses, and lipoproteins [2].

碳菁染料广泛用于脂性示踪，适用于标记细胞、细胞器、脂质体、病毒及脂蛋白。长链碳菁如 DiO (DiOC18(3))、DiI (DiIC18(3))、DiD (DiIC18(5)) 和 DiR，及二烷基氨基苯乙烯基染料 DiA (4-Di-16-ASP) 用于标记膜和其他疏水结构。DiIC16(3) 的烷基取代基 (C16) 比 DiI (C18) 短。它们在脂类环境中具高消光系数、环境依赖性荧光和短激发态寿命。水中荧光弱但在膜或亲脂性生物分子结合下荧光增强并具光稳定性，适合细胞质膜染色。涂于细胞后，染料于质膜横向扩散，整细胞染色。 DiO、DiI、DiD 和 DiR 分别表现绿色、橙色、红色和红外荧光，便于活细胞多色成像和流式细胞术分析。DiO 和 DiI 对应标准 FITC 和 TRITC 荧光通道。DiI 剂量较低毒性，常用于 LDL 和 HDL 测定。DiA 也用于神经元示踪。制备 Di 染色溶液时，推荐在 DMF、DMSO 或乙醇中制备 1-5 mM 储备溶液，DMF 为佳。储备溶液宜及时使用，未用完的 -20℃ 储存。反复冻融应避免，溶液可保存 6 个月。工作溶液需现配现用，将储备溶液稀释于无血清培养基、HBS 或 PBS 至 1-5 μM，浓度依实验条件调整。对于悬浮细胞，离心收集并 PBS 洗两次，每次 5 分钟，细胞密度 1×10^6/mL，加入工作液室温孵育 5-30 分钟。400 g，4℃ 离心 3-4 分钟，弃上清，再 PBS 洗两次。用无血清培养基或 PBS 重悬后，采用荧光显微镜或流式细胞仪观察。对于贴壁细胞，培养于无菌盖玻片，移出盖玻片，去除多余培养基，加染料工作液晃动覆盖细胞，孵育 5-30 分钟。吸去染液，培养基洗 2-3 次，观察。