AF488 NHS ester is an amine-specific fluorescence probe (Em=525 nm) that reacts with sulfhydryl groups and amines in aqueous and biological samples, altering their chemical structure and fluorescence properties after derivatization [1].

AF488 NHS ester的IgG荧光标记与抗IgG固相肽库筛选：首先，将冻干的IgG溶解在浓度为5 g/L的50 mM磷酸钠和20 mM氯化钠的溶液（pH 8.3）中。然后，将1 mg的AF488 NHS ester溶解在100 µL extra dry DMF中，并加入1 mL上述IgG溶液，在室温下进行1小时的旋转孵育。接着，使用Amicon Ultra 0.5-mL离心式过滤装置与3-kDa MWCO过滤器收集样品。去保护的六聚体或四聚体文库在50 mM磷酸钠和150 mM氯化钠的溶液中（三次洗涤）平衡。随后，用50 mM磷酸钠、150 mM氯化钠和0.2%吐温（pH 7.4）的溶液稀释IgG-AF488至终浓度为1.3 mg/mL。然后，将上述文库与稀释后的IgG-AF488在2-8°C下孵育过夜。之后，用50 mM磷酸钠、150 mM氯化钠、0.1%吐温20的溶液（pH 7.4，PBS-T）洗涤树脂珠。树脂珠被沉积在40 µL PBS-T的96孔板中，每孔一个珠，并借助荧光显微镜以10倍放大率进行成像。在480 nm激发下进行Alexa Fluor 488的荧光测量与筛选，使用510 nm的发射强度作为阈值。AF488 NHS ester储存液为20 mM浓度，用DMF配制，建议分装后于-20°C避光保存。