Mouse CD3+ Cell Removal Beads

1. 小鼠细胞

2. 人源细胞

1. 效果好：去除率可达99.7%。
2. 活性高：非CD3+细胞状态良好，功能正常。
3. 易操作：仅1步操作可完成CD3+细胞的富集或去除。
4. 速度快：只需35 min即可完成CD3+细胞的富集或去除。

适用于从小鼠脾脏和淋巴结中去除CD3+细胞。

以去除小鼠脾脏中的CD3+ 细胞为例：

1. 制备单细胞悬液：将脾脏放置在70 μm的细胞筛网上研磨，并用预冷的PBS冲洗筛网，将细胞悬液收集至50 mL离心管中，500 g离心5 min。
2. 离心结束后，弃去上清液，加入5 mL红细胞裂解液 (ACK) 并在室温下裂解5 min。随后加入20 mL PBS，500 g离心5 min。
   注：红细胞裂解的时间和用量可根据所用裂解液进行调整，少量红细胞的残留对后续分选和细胞纯度影响不大。
3. 离心结束后，弃去上清液，将脾细胞重悬于PBS 中，并用70 μm的细胞筛网过滤。细胞计数完成后，再次以500 g离心5 min。
   注：为避免组织碎片和细胞团块影响后续分选的纯度，细胞悬液需经过细胞筛网过滤。
4. 离心结束后，弃去上清液，将细胞重悬于分选缓冲液中，并调整细胞浓度至2×10^8个细胞/mL。
   注：分选缓冲液推荐配方：PBS，含有2 mM EDTA和2% FBS；或PBS，2 mM EDTA和0.5% BSA。缓冲液需预先经0.22 μm滤膜过滤灭菌。
5. 磁珠预处理：涡旋振荡重悬磁珠，将所需量的磁珠移至1.5 mL离心管中，加入1 mL分选缓冲液，10000 g离心1 min，弃去上清。重复以上洗涤步骤一次。加入与原体积相同的分选缓冲液重悬磁珠。若使用50 μL磁珠进行清洗，则清洗后用50 μL分选缓冲液重悬。
6. 将500 μL的细胞悬液（含1×10^8个细胞）加入无菌流式管底部，在流式管中加入50 μL经过预处理的磁珠，混合均匀，4°C下旋转孵育30 min。
   注：细胞加入流式管底部时，避免沿管壁添加。根据磁力架的不同，也可使用离心管进行细胞分选。若分选的细胞数量较多，磁珠的用量需按比例增加。例如，分选1.5×10^8个细胞时，在1.5 mL离心管中加入750 μL细胞悬液和75 μL磁珠。若分选的细胞少于5×10^7个，则应将细胞悬液体积补至250 μL，并加入25 μL磁珠。
7. 孵育结束后，在流式管中加入分选缓冲液将液体体积补至3 mL，用移液器轻轻吹打混匀5次，避免剧烈振荡或上下颠倒混匀。
8. 将装有细胞的流式管置于磁力架上静置5 min。
9. 上清液中含有目的细胞，将细胞悬液轻轻倒入无菌离心管中，倒出过程中流式管保持在磁力架上。500 g离心5 min，弃去上清，收集细胞。
10. 根据实验要求洗涤细胞后，将其重悬于所需的缓冲液或培养基中，便可用于后续的分子生物学或细胞生物学实验。

4℃，2年。

1. 避免冷冻试剂盒各组分。磁珠应保存在储存溶液中，防止干燥。
2. 在从磁珠保存管中取出磁珠之前，应充分震荡以确保均匀悬浮。操作过程中注意避免产生气泡。
3. 建议使用质量较好的移液器吸头和反应管，以避免因磁珠和溶液附着而造成损失。
4. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

• C0152-小鼠 CD3+ 细胞去除磁珠说明书-中文(0.98 MB)