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规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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5 mL | ¥ 3,470 | 5日内发货 | |
10 mL | ¥ 6,310 | 5日内发货 |
琼脂糖链霉亲和素磁珠 | 特性 |
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粒径 | 10-30 μm |
磁珠基质 | 琼脂糖 |
生物素化IgG结合能力 | 800 μg/mL |
浓度 | 20% (V/V) |
表面基团 | 亲水基团 |
保存溶液 | 1×PBS,含 0.1%(W/V)BSA,0.1%(V/V)proclin-300 |
应用方向推荐 | 蛋白富集与纯化 |
1. 缓冲液准备
以下为常用的缓冲液成分,使用时可根据需要调整盐浓度及pH:
Buffer(适用于结合生物素化抗体/蛋白):PBS,pH 7.4,含0.05% Tween-20,可根据需要添加0.01%~0.1% BSA。
2. 结合生物素化抗体/蛋白
1)将磁珠瓶用漩涡振荡器振荡20 s,使磁珠重新悬浮。用移液器吸取100 μL磁珠到新的离心管中。将离心管放入磁性分离器,静置1 min,进行磁性分离,吸去上清液,取下离心管。
注:用户可根据生物素化分子的数量,参考产品说明中的磁珠载量,计算所需磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1-2倍,以达到磁珠饱和。
2)向离心管中加入1 mL Buffer,盖上管盖,充分振荡使磁珠重新悬浮。进行磁性分离,吸去上清液。
注:如果在步骤1)中使用的磁珠体积超过1 mL,则应加入与磁珠体积等量的Buffer。
3)重复步骤2)一次,共洗涤磁珠三次。
4)向离心管中加入1 mL用Buffer II稀释的生物素化抗体/蛋白(使磁珠浓度达到1 mg/mL),充分振荡使磁珠重新悬浮。将离心管放在旋转混合仪上,在室温下旋转混合60 min。
5)进行磁性分离,将上清液转移到新的离心管中。
6)按照步骤2)的方法,洗涤磁珠五次。
7)根据后续实验的需要,加入Buffer或其他缓冲液,使磁珠重新悬浮。至此,生物素化抗体/蛋白的结合步骤完成,磁珠可用于后续操作。
3. 分离生物素和SA磁珠
如果需要对生物素和SA磁珠进行分离,可采用以下方法:
方法一:0.1% SDS,煮沸5min;
方法二:pH=8.2,含95%甲酰胺的 10mM EDTA 中,65℃ 5min 或90℃ 2min。脱落率95%。
4℃,2年 。
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