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规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
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5 mL | ¥ 928 | 5日内发货 | |
50 mL | ¥ 4,736 | 5日内发货 |
产品名称 | Mag Beads NH2 (2 μm)(C0077) | Magrose Beads NH2 (30-150 μm)(C0082) | Magrose Beads NH2 (10-30 μm)(C0083) | Magrose Beads NH2 (10-30 μm, Ultra-suspension)(C0084) |
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平均粒径 | 2 μm(单分散)* | 30-150 μm | 10-30 μm | 10-30 μm,超悬浮 |
表面基团/含量 | ~200 μmol/g | ~50 μmol/mL gel | ~50 μmol/mL gel | ~50 μmol/mL gel |
磁核 | Fe3O4 | Fe3O4 | Fe3O4 | Fe3O4 |
壳层 | 聚合物 | 琼脂糖 | 琼脂糖 | 琼脂糖 |
磁性类型 | 超顺磁性 | 超顺磁性 | 超顺磁性 | 超顺磁性 |
饱和磁化强度 | 45.23 emu/g | 41.09 emu/g | 32.87 emu/g | 28.70 emu/g |
比表面积 | 7.16 m^2/g | / | / | / |
保存溶液 | 20%乙醇 | 20%乙醇 | 20%乙醇 | 20%乙醇 |
*水化平均粒径,Malvern Nano测定
磁珠与生物分子的偶联方法,以蛋白A为例:
1. 磁珠预处理
1)将氨基磁珠用漩涡振荡器振荡充分混匀,然后使用移液器吸取100 µL磁珠悬液置于1 mL EP管中。
2)将EP管放入磁性分离器,静置1 min,进行磁性分离,吸去上清液,取下EP管。
3)向EP管中加入200 µL PBS 溶液(50 mM PBS,pH 7.4),洗涤3次,每次磁性分离后吸去上清液。
2. 戊二醛活化
1)向EP管中加入100 µL新鲜配制的15%戊二醛溶液,漩涡混匀使磁珠充分悬浮。
2)用锡箔纸包裹,25℃避光反应1 h,防止戊二醛聚合。反应期间保持磁珠悬浮,可使用垂直混合仪进行混匀。
3. 活化后洗涤
磁珠活化后,进行磁性分离,吸去上清液,用50 mM PBS(pH 7.4)缓冲液洗涤3次。
4. 磁珠偶联
1)向EP管中加入50~200 µg生物配体(具体用量及浓度需根据实验优化),保持溶液pH≈8.0,并在必要时加入0.05% Tween-20以提高磁珠分散性。
2)轻柔混匀,锡箔纸包裹避光,25℃偶联3 h,或25℃偶联1 h后放置4℃过夜。偶联保持磁珠悬浮,可使用垂直混合仪进行混匀。
注:由于戊二醛在280 nm处有吸收峰,磁珠偶联蛋白的结合量不能通过OD280测定,可使用BCA试剂盒(C0050)或蛋白电泳法进行间接测定。
5. 偶联后封闭
1)进行磁性分离,吸去上清液。加入200~1000 µL BSA/PBS 溶液(pH 7.2,含5% BSA)重悬磁珠,必要时可使用超声波辅助。
2)25℃反应1 h,以封闭磁珠表面非特异性吸附位点,期间保持磁珠悬浮,可使用垂直混合仪进行混匀。
6. 保存
1)进行磁性分离,吸去上清液。用200 µL PBS溶液(pH 7.2)或保存溶液洗涤3次。
2)然后重新悬浮磁珠于保存溶液中(根据需要调整磁珠浓度)。磁珠保存于4℃,必要时可在保存溶液中加入0.02%(W/V)叠氮化钠(NaN3)以抑制细菌生长。
4℃,2年。
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