Magrose Beads DEAE

• 磁响应速度快：缩短操作时间，提高实验效率。
• 良好的分散性和重悬性：磁珠易于操作，显著提升操作便捷性。
• 配基具备优异的物理化学稳定性：确保实验结果更可靠、重复性更高。

• 适用于带负电荷的分子，例如：蛋白质、核酸、抗体和酶等通过静电引力进行结合，从混合样本中分离纯化目标物质。

注：
a) 磁珠蛋白结合量与目标蛋白特性相关，此处仅做参考值。
b) 1 mL磁珠悬液中含有100 μL磁珠。

以纯化含BSA蛋白样品为例：

1. 缓冲液准备
根据目标蛋白选择合适的平衡缓冲液，通常为低盐缓冲液，如1×PBS。为了更高效地吸附目标物质，平衡缓冲液应保持较低的离子强度，并选择一个与目标蛋白等电点相差至少1个pH单位的pH值。所选盐缓冲液的pH波动应控制在0.5 pH单位以内。

2. 磁珠预处理（平衡）
1)将DEAE磁珠漩涡振荡30 s，使其充分重悬。取适量10%（V/V）的磁珠悬液置于50 mL离心管中。
2)将离心管放入磁性分离器，静置1 min，进行磁性分离，吸去上清液，取下离心管。
3)加入20 mL平衡缓冲液，洗涤磁珠3次，每次垂直混合2 min。
注：为获得目标蛋白的最大回收率，建议加入过量磁珠，通常大于蛋白结合量的20%。对于低丰度目标蛋白的样品，回收率可能降低，此时应增加磁珠的用量。

3. 蛋白吸附
1)将预处理的磁珠加入含有BSA蛋白的样品溶液中，漩涡振荡30 s后，置于垂直混合仪上混合30-60 min，以确保样品与磁珠充分接触并吸附。
注：吸附时间取决于目标蛋白的特性。
2)进行磁性分离，吸去上清液。

4. 磁珠洗涤
加入20 mL平衡缓冲液，漩涡振荡30 s后进行磁性分离，吸去上清液。重复此操作3次。

5. 目标蛋白洗脱
1)加入适量的洗脱液至洗涤后的磁珠中，移液器吹打或涡旋振荡使其迅速重悬。将离心管置于垂直混合仪上混合10-15 min。
注：洗脱方式可以选择高盐浓度洗脱（含1-2 M NaCl的平衡缓冲液）或低pH洗脱（选择低于目标蛋白等电点的pH范围）。
2)进行磁性分离，收集上清液至新的离心管中。

6. 磁珠再生
磁珠通常可以通过2 M NaCl溶液洗涤3-5次，随后用平衡缓冲液再平衡。

7. 在位清洗（CIP）
磁珠经过多次使用后，可能会有沉淀蛋白、强疏水性蛋白以及脂蛋白等杂质非特异性吸附到磁珠表面，影响其结合效率。为保证磁珠的持续高效使用，建议进行在位清洗（CIP，Clean-In-Place）操作。通过定期清洗，可以有效去除这些杂质，延长磁珠的使用寿命并确保纯化效果。
1)依次使用1.0 M NaOH、70%乙醇或30%异丙醇、纯化水洗涤磁珠各2次。
2)最后加入20%乙醇重悬磁珠，并置于2~8℃保存。

4℃，2年。

1. 避免对磁珠进行冷冻、干燥和高速离心等操作。
2. 为了减少磁珠的损失，每次磁性分离的时间不应少于1 min。
3. 从磁珠保存管中取出磁珠之前，应充分震荡以确保均匀悬浮。操作过程中注意避免产生气泡。
4. 建议使用质量较好的移液器吸头和反应管，以避免因磁珠和溶液附着而造成损失。
5. 磁珠与溶液混合过程中，如果溶液粘稠导致翻转离心管无法重悬磁珠，可以使用移液器吹打或瞬时漩涡混合，使磁珠充分重悬。
6. 可根据需求，用纯化水或缓冲液磁吸洗涤磁珠2~3次，去除保存液中乙醇。
7. 盐浓度与pH值均会影响特异性蛋白的结合与洗脱，建议用户自行摸索不同蛋白的结合和洗脱条件，以保证蛋白纯化量和纯度。
8. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
9. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作