Magrose Beads NH2 (10-30 μm)

• 氨基含量丰富，约为50 μmol/mL gel，确保目标物质结合量高且非特异性吸附低，适用于分离和纯化领域。
• 磁珠具有超顺磁性和高磁响应性，磁响应时间小于10 s，显著节省操作时间。
• 磁珠分散均匀，具备良好的操作性能和重悬性，提高操作的便捷性。
• 物理化学稳定性及批次间重复性良好，批间氨基含量的变异系数CV＜5%，确保实验结果的稳定性和可靠性。

• 生物配体固定：包括抗体、多肽、蛋白质、寡聚核苷酸等生物分子，通过共价偶联的方式固定在磁珠表面，用于各种生物分离和检测应用。
• 蛋白纯化：利用固定在磁珠表面的特异性配体，从复杂的混合物中高效纯化目标蛋白。

*水化平均粒径，Malvern Nano测定

磁珠与生物分子的偶联方法，以蛋白A为例：

1. 磁珠预处理
1)将氨基磁珠用漩涡振荡器振荡充分混匀，然后使用移液器吸取100 µL磁珠悬液置于1 mL EP管中。
2)将EP管放入磁性分离器，静置1 min，进行磁性分离，吸去上清液，取下EP管。
3)向EP管中加入200 µL PBS 溶液（50 mM PBS，pH 7.4），洗涤3次，每次磁性分离后吸去上清液。

2. 戊二醛活化
1)向EP管中加入100 µL新鲜配制的15%戊二醛溶液，漩涡混匀使磁珠充分悬浮。
2)用锡箔纸包裹，25℃避光反应1 h，防止戊二醛聚合。反应期间保持磁珠悬浮，可使用垂直混合仪进行混匀。

3. 活化后洗涤
磁珠活化后，进行磁性分离，吸去上清液，用50 mM PBS（pH 7.4）缓冲液洗涤3次。

4. 磁珠偶联
1)向EP管中加入50~200 µg生物配体（具体用量及浓度需根据实验优化），保持溶液pH≈8.0，并在必要时加入0.05% Tween-20以提高磁珠分散性。
2)轻柔混匀，锡箔纸包裹避光，25℃偶联3 h，或25℃偶联1 h后放置4℃过夜。偶联保持磁珠悬浮，可使用垂直混合仪进行混匀。
注：由于戊二醛在280 nm处有吸收峰，磁珠偶联蛋白的结合量不能通过OD280测定，可使用BCA试剂盒（C0050）或蛋白电泳法进行间接测定。

5. 偶联后封闭
1)进行磁性分离，吸去上清液。加入200~1000 µL BSA/PBS 溶液（pH 7.2，含5% BSA）重悬磁珠，必要时可使用超声波辅助。
2)25℃反应1 h，以封闭磁珠表面非特异性吸附位点，期间保持磁珠悬浮，可使用垂直混合仪进行混匀。

6. 保存
1)进行磁性分离，吸去上清液。用200 µL PBS溶液（pH 7.2）或保存溶液洗涤3次。
2)然后重新悬浮磁珠于保存溶液中（根据需要调整磁珠浓度）。磁珠保存于4℃，必要时可在保存溶液中加入0.02%（W/V）叠氮化钠（NaN3）以抑制细菌生长。

4℃，2年。

1. 避免对磁珠进行冷冻、干燥和高速离心等操作。
2. 为了减少磁珠的损失，每次磁性分离的时间不应少于1 min。
3. 从磁珠保存管中取出磁珠之前，应充分震荡以确保均匀悬浮。操作过程中注意避免产生气泡。
4. 建议使用质量较好的移液器吸头和反应管，以避免因磁珠和溶液附着而造成损失。
5. 磁珠与溶液混合过程中，如果溶液粘稠导致翻转离心管无法重悬磁珠，可以使用移液器吹打或瞬时漩涡混合，使磁珠充分重悬。
6. 可根据需求，用纯化水或缓冲液磁吸洗涤磁珠2~3次，去除保存液中乙醇。
7. 本磁珠未经活化，需先根据参考方法活化之后才能进行偶联操作。
8. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
9. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。