Mag Beads Streptavidin (2.8 μm)

• 生物素分子结合能力优秀
• 稳定性良好
• 磁响应性能快速灵敏
• 适应广泛的实验条件

• 免疫检测、分离蛋白：特异性结合生物素化抗体或抗原，可用作免疫检测和ELISA等固相反应载体。
• 分离核酸、制备核酸探针：特异性结合生物素化的核酸探针，可用于DNA和RNA的杂交实验。
• DNA-蛋白质相互作用研究：特异性结合生物素化的靶点DNA或RNA片段，可用于研究蛋白质与核酸的相互作用。
• 细胞分选与激活：可固定抗体，特异性识别目标细胞。

1. 缓冲液准备
以下为常用的缓冲液成分，使用时可根据需要调整盐浓度及pH：
1)Buffer I（适用于结合生物素化核酸）：10 mM Tris-HCl（pH 7.5），1 mM EDTA，1 M NaCl，0.01%~0.1% Tween-20。
2)Buffer II（适用于结合生物素化抗体/蛋白）：PBS，pH 7.4，含0.05% Tween-20，可根据需要添加0.01%~0.1% BSA。
3)化学发光 Washing buffer：根据需求配制洗液，使用时平衡至室温。

2. 结合生物素化核酸
1)将磁珠瓶用漩涡振荡器振荡20 s，使磁珠重新悬浮。用移液器吸取100 μL磁珠到新的离心管中。将离心管放入磁性分离器，静置1 min，进行磁性分离，吸去上清液，取下离心管。
注：用户可根据生物素化分子的数量，参考产品说明中的磁珠载量，计算所需磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1-2倍，以达到磁珠饱和。
2)向离心管中加入1 mL Buffer I，盖上管盖，充分振荡使磁珠重新悬浮。进行磁性分离，吸去上清液。
注：如果在步骤1）中使用的磁珠体积超过1 mL，则应加入与磁珠体积等量的Buffer I。
3)重复步骤2）一次。
4)向离心管中加入500 μL用Buffer I稀释的生物素化核酸（使磁珠浓度为2 mg/mL），充分振荡使磁珠重新悬浮。将离心管放在旋转混合仪上，在室温下旋转混合30 min。
5)进行磁性分离，将上清液转移到新的离心管中。
6)按照步骤2）的方法，洗涤磁珠三次。
7)根据后续实验的要求，加入适量的低盐缓冲液，使磁珠重新悬浮。至此，生物素化核酸的结合步骤完成，磁珠可用于后续操作。
8)用户可以通过测量反应前后核酸的浓度，计算结合到磁珠上的核酸量：（反应前浓度-反应后浓度）×反应溶液体积。

3. 结合生物素化抗体/蛋白
1)将磁珠瓶用漩涡振荡器振荡20 s，使磁珠重新悬浮。用移液器吸取100 μL磁珠到新的离心管中。将离心管放入磁性分离器，静置1 min，进行磁性分离，吸去上清液，取下离心管。
注：用户可根据生物素化分子的数量，参考产品说明中的磁珠载量，计算所需磁珠量。建议生物素化分子的加入量为磁珠载量的1-2倍，以达到磁珠饱和。
2)向离心管中加入1 mL Buffer II，盖上管盖，充分振荡使磁珠重新悬浮。进行磁性分离，吸去上清液。
注：如果在步骤1）中使用的磁珠体积超过1 mL，则应加入与磁珠体积等量的Buffer II。
3)重复步骤2）一次，共洗涤磁珠三次。
4)向离心管中加入1 mL用Buffer II稀释的生物素化抗体/蛋白（使磁珠浓度达到1 mg/mL），充分振荡使磁珠重新悬浮。将离心管放在旋转混合仪上，在室温下旋转混合60 min。
5)进行磁性分离，将上清液转移到新的离心管中。
6)按照步骤2）的方法，洗涤磁珠五次。
7)根据后续实验的需要，加入Buffer II或其他缓冲液，使磁珠重新悬浮。至此，生物素化抗体/蛋白的结合步骤完成，磁珠可用于后续操作。

4. 磁微粒化学发光免疫诊断
1)调整磁珠至合适的浓度（建议0.2-0.8 mg/mL），用漩涡振荡器振荡20 s，使磁珠重新悬浮。用移液器吸取50 μL磁珠至96孔板中，进行磁性分离，吸去上清液，取下96孔板。
2)每孔加入100 μL生物素化捕获抗体，充分振荡使磁珠重新悬浮，置于37℃恒温箱中孵育15 min。进行磁性分离，吸去上清液，取下96孔板。
3)每孔加入200 μL Washing buffer，充分振荡使磁珠重新悬浮，进行磁性分离，吸去上清液。重复此步骤两次，共洗涤三次。
4)每孔加入50 μL待测物标准品或待测样本，充分振荡使磁珠重新悬浮，置于37℃恒温箱中孵育15 min。进行磁性分离，吸去上清液，取下96孔板。
5)每孔加入200 μL Washing buffer，充分振荡使磁珠重新悬浮，进行磁性分离，吸去上清液。重复此步骤两次，共洗涤三次。
6)每孔加入100 μL酶标记抗体，充分振荡使磁珠重新悬浮，置于37℃恒温箱中孵育15 min。进行磁性分离，吸去上清液，取下96孔板。
7)每孔加入200 μL Washing buffer，充分振荡使磁珠重新悬浮，进行磁性分离，吸去上清液。重复此步骤两次，共洗涤三次。
8)每孔加入150 μL底物液，充分振荡使磁珠重新悬浮，避光孵育5 min。
9)使用化学发光仪对96孔板进行读数，进行相应的数据处理。

5. 分离生物素和SA磁珠
如果需要对生物素和SA磁珠进行分离，可采用以下方法：
方法一：0.1% SDS，煮沸5min；
方法二：pH=8.2，含95%甲酰胺的 10mM EDTA 中，65℃ 5min 或90℃ 2min。脱落率95%。

• 保存溶液：1×PBS，含 0.1%（W/V）BSA，0.1%（V/V）proclin-300。
• 保存时间：4℃，2年。

1. 避免冷冻磁珠。
2. 为了减少磁珠的损失，每次磁性分离的时间不应少于1 min。
3. 从磁珠保存管中取出磁珠之前，应充分震荡以确保均匀悬浮。操作过程中注意避免产生气泡。
4. 建议使用质量较好的移液器吸头和反应管，以避免因磁珠和溶液附着而造成损失。
5. 生物素化分子的大小会影响磁珠的承载量。用户需要根据实验确定磁珠对特定生物素化分子的载量。
6. 生物素化分子的加入量应为磁珠载量的1-2倍，以确保磁珠饱和。
7. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
8. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

• C0092-链霉亲和素磁珠 (2.8 μm)说明书-中文(1023 KB)